1. Σκοπός: Αυτή η διαδικασία στοχεύει στην παροχή μιας τυποποιημένης διαδικασίας για άσηπτες επεμβάσεις και προστασία αποστειρωμένων δωματίων.
2. Πεδίο εφαρμογής: εργαστήριο βιολογικών δοκιμών
3. Υπεύθυνο: Ελεγκτής επόπτη QC
4.Ορισμός: Κανένα
5. Προφυλάξεις ασφαλείας
Εκτελέστε αυστηρά άσηπτες εργασίες για να αποτρέψετε τη μικροβιακή μόλυνση.Οι χειριστές θα πρέπει να σβήσουν τη λάμπα UV πριν εισέλθουν σε αποστειρωμένο δωμάτιο.
6.Διαδικασίες
6.1.Το αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να είναι εξοπλισμένο με αποστειρωμένο χειρουργείο και θάλαμο αποθήκευσης.Η καθαριότητα του αποστειρωμένου χώρου χειρουργείου θα πρέπει να αγγίζει την τάξη 10000. Η εσωτερική θερμοκρασία πρέπει να διατηρείται στους 20-24°C και η υγρασία πρέπει να διατηρείται στο 45-60%.Η καθαριότητα του καθαρού πάγκου θα πρέπει να φτάσει την κατηγορία 100.
6.2.Το αποστειρωμένο δωμάτιο πρέπει να διατηρείται καθαρό και απαγορεύεται αυστηρά η συσσώρευση υπολειμμάτων για την αποφυγή μόλυνσης.
6.3.Αποτρέψτε αυστηρά τη μόλυνση όλου του εξοπλισμού αποστείρωσης και των μέσων καλλιέργειας.Όσα είναι μολυσμένα θα πρέπει να σταματήσουν να τα χρησιμοποιούν.
6.4.Το αποστειρωμένο δωμάτιο πρέπει να είναι εξοπλισμένο με απολυμαντικά συγκέντρωσης εργασίας, όπως διάλυμα κρεσόλης 5%, αλκοόλη 70%, διάλυμα χλωρομεθειονίνης 0,1% κ.λπ.
6.5.Το αποστειρωμένο δωμάτιο πρέπει να αποστειρώνεται τακτικά και να καθαρίζεται με κατάλληλο απολυμαντικό για να διασφαλίζεται ότι η καθαριότητα του αποστειρωμένου δωματίου πληροί τις απαιτήσεις.
6.6.Όλα τα εργαλεία, τα εργαλεία, τα πιάτα και άλλα αντικείμενα που πρέπει να μεταφερθούν σε αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να τυλίγονται σφιχτά και να αποστειρώνονται με κατάλληλες μεθόδους.
6.7.Πριν μπει σε αποστειρωμένο δωμάτιο, το προσωπικό πρέπει να πλένει τα χέρια του με σαπούνι ή απολυμαντικό και στη συνέχεια να φοράει ειδικά ρούχα εργασίας, παπούτσια, καπέλα, μάσκες και γάντια στο buffer room (ή να σκουπίζει ξανά τα χέρια του με αιθανόλη 70%) πριν μπει σε αποστειρωμένο δωμάτιο.Εκτελέστε επεμβάσεις σε βακτηριακό θάλαμο.
6.8.Πριν χρησιμοποιήσετε το αποστειρωμένο δωμάτιο, η λάμπα υπεριώδους σε αποστειρωμένο δωμάτιο πρέπει να είναι ενεργοποιημένη για ακτινοβόληση και αποστείρωση για περισσότερο από 30 λεπτά και ο καθαρός πάγκος πρέπει να είναι ενεργοποιημένος για να φυσάει αέρας ταυτόχρονα.Μετά την ολοκλήρωση της επέμβασης, το αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να καθαριστεί εγκαίρως και στη συνέχεια να αποστειρωθεί με υπεριώδες φως για 20 λεπτά.
6.9.Πριν από την επιθεώρηση, η εξωτερική συσκευασία του δείγματος δοκιμής θα πρέπει να διατηρείται ανέπαφη και δεν πρέπει να ανοίγεται για να αποφευχθεί η μόλυνση.Πριν από την επιθεώρηση, χρησιμοποιήστε μπάλες βαμβακιού 70% αλκοόλης για να απολυμάνετε την εξωτερική επιφάνεια.
6.10.Κατά τη διάρκεια κάθε επέμβασης, θα πρέπει να γίνεται αρνητικός έλεγχος για να ελέγχεται η αξιοπιστία της ασηπτικής λειτουργίας.
6.11.Όταν απορροφάτε βακτηριακό υγρό, πρέπει να χρησιμοποιείτε μια μπάλα αναρρόφησης για να το απορροφήσετε.Μην αγγίζετε το καλαμάκι απευθείας με το στόμα σας.
6.12.Η βελόνα εμβολιασμού πρέπει να αποστειρώνεται με φλόγα πριν και μετά από κάθε χρήση.Μετά την ψύξη, η καλλιέργεια μπορεί να εμβολιαστεί.
6.13.Τα καλαμάκια, οι δοκιμαστικοί σωλήνες, τα τρυβλία Petri και άλλα σκεύη που περιέχουν βακτηριακό υγρό θα πρέπει να εμποτιστούν σε κουβά αποστείρωσης που περιέχει 5% διάλυμα Lysol για απολύμανση και να αφαιρεθούν και να ξεπλυθούν μετά από 24 ώρες.
6.14.Εάν χυθεί βακτηριακό υγρό στο τραπέζι ή στο πάτωμα, θα πρέπει να ρίξετε αμέσως διάλυμα καρβολικού οξέος 5% ή 3% Λυσόλης στη μολυσμένη περιοχή για τουλάχιστον 30 λεπτά πριν την επεξεργαστείτε.Όταν τα ρούχα εργασίας και τα καπέλα είναι μολυσμένα με βακτηριακό υγρό, θα πρέπει να αφαιρούνται αμέσως και να πλένονται μετά από αποστείρωση με ατμό υψηλής πίεσης.
6.15.Όλα τα αντικείμενα που περιέχουν ζωντανά βακτήρια πρέπει να απολυμαίνονται πριν ξεπλυθούν κάτω από τη βρύση.Απαγορεύεται αυστηρά η ρύπανση της αποχέτευσης.
6.16.Ο αριθμός των αποικιών σε αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να ελέγχεται κάθε μήνα.Με ανοιχτό τον καθαρό πάγκο, πάρτε έναν αριθμό αποστειρωμένων τρυβλίων Petri με εσωτερική διάμετρο 90 mm και εγχύστε ασηπτικά περίπου 15 ml θρεπτικού μέσου καλλιέργειας άγαρ που έχει λιώσει και ψυχθεί στους 45°C περίπου.Μετά τη στερεοποίηση, τοποθετήστε το ανάποδα στους 30 έως 35°C Επώαση για 48 ώρες σε επωαστήρα ℃.Αφού αποδείξετε τη στειρότητα, πάρτε 3 έως 5 πιάτα και τοποθετήστε τα αριστερά, στη μέση και δεξιά της θέσης εργασίας.Αφού ανοίξετε το κάλυμμα και τα εκθέσετε για 30 λεπτά, τοποθετήστε τα ανάποδα σε επωαστήρα 30 έως 35°C για 48 ώρες και αφαιρέστε τα.εξετάζω.Ο μέσος αριθμός διάφορων βακτηρίων στο πιάτο σε μια καθαρή περιοχή κατηγορίας 100 δεν πρέπει να υπερβαίνει τη 1 αποικία και ο μέσος αριθμός σε ένα καθαρό δωμάτιο κατηγορίας 10000 δεν πρέπει να υπερβαίνει τις 3 αποικίες.Σε περίπτωση υπέρβασης του ορίου, το αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να απολυμανθεί σχολαστικά έως ότου οι επαναλαμβανόμενες επιθεωρήσεις πληρούν τις απαιτήσεις.
7. Βλ.
8. Τμήμα Διανομής: Τμήμα Διαχείρισης Ποιότητας
Τεχνικές οδηγίες για το Clean Room:
Αφού αποκτήσουμε ένα αποστειρωμένο περιβάλλον και αποστειρωμένα υλικά, πρέπει να διατηρήσουμε μια στείρα κατάσταση για να μελετήσουμε έναν συγκεκριμένο γνωστό μικροοργανισμό ή να αξιοποιήσουμε τις λειτουργίες του.Διαφορετικά, μπορούν εύκολα να αναμειχθούν διάφοροι μικροοργανισμοί από το εξωτερικό. Το φαινόμενο της ανάμειξης άσχετων μικροοργανισμών από το εξωτερικό ονομάζεται στη μικροβιολογία μολυσματικά βακτήρια.Η πρόληψη της μόλυνσης είναι μια κρίσιμη τεχνική στη μικροβιολογική εργασία.Η πλήρης αποστείρωση αφενός και η πρόληψη της μόλυνσης αφετέρου είναι δύο πτυχές της ασηπτικής τεχνικής.Επιπλέον, πρέπει να αποτρέψουμε τους υπό μελέτη μικροοργανισμούς, ιδιαίτερα τους παθογόνους μικροοργανισμούς ή τους γενετικά τροποποιημένους μικροοργανισμούς που δεν υπάρχουν στη φύση, να διαφύγουν από τα πειραματικά μας δοχεία στο εξωτερικό περιβάλλον.Για τους σκοπούς αυτούς, στη μικροβιολογία, υπάρχουν πολλά μέτρα.
Το αποστειρωμένο δωμάτιο είναι συνήθως ένα μικρό δωμάτιο ειδικά διαμορφωμένο στο μικροβιολογικό εργαστήριο.Μπορεί να κατασκευαστεί με φύλλα και γυαλί.Η περιοχή δεν πρέπει να είναι πολύ μεγάλη, περίπου 4-5 τετραγωνικά μέτρα και το ύψος πρέπει να είναι περίπου 2,5 μέτρα.Ένα buffer room θα πρέπει να δημιουργηθεί έξω από το αποστειρωμένο δωμάτιο.Η πόρτα του χώρου αποθήκευσης και η πόρτα του αποστειρωμένου δωματίου δεν πρέπει να βλέπουν την ίδια κατεύθυνση για να αποτρέψουν τη ροή του αέρα από το να φέρει διάφορα βακτήρια.Τόσο ο αποστειρωμένος χώρος όσο και ο χώρος αποθήκευσης πρέπει να είναι αεροστεγείς.Ο εξοπλισμός αερισμού εσωτερικού χώρου πρέπει να διαθέτει συσκευές φιλτραρίσματος αέρα.Το δάπεδο και οι τοίχοι του αποστειρωμένου δωματίου πρέπει να είναι λεία, να είναι δύσκολο να φυλάσσονται ακαθαρσίες και να καθαρίζονται εύκολα.Η επιφάνεια εργασίας πρέπει να είναι επίπεδη.Τόσο το αποστειρωμένο δωμάτιο όσο και το buffer room είναι εξοπλισμένα με υπεριώδη ακτινοβολία.Τα υπεριώδη φώτα στο αποστειρωμένο δωμάτιο απέχουν 1 μέτρο από την επιφάνεια εργασίας.Το προσωπικό που εισέρχεται σε αποστειρωμένο δωμάτιο θα πρέπει να φοράει αποστειρωμένα ρούχα και καπέλα.
Επί του παρόντος, τα αποστειρωμένα δωμάτια υπάρχουν κυρίως σε μικροβιολογικά εργοστάσια, ενώ τα γενικά εργαστήρια χρησιμοποιούν καθαρό πάγκο.Η κύρια λειτουργία του καθαρού πάγκου είναι η χρήση συσκευής στρωτή ροής αέρα για την αφαίρεση διαφόρων μικροσκοπικών σκόνης συμπεριλαμβανομένων των μικροοργανισμών στην επιφάνεια εργασίας.Η ηλεκτρική συσκευή επιτρέπει στον αέρα να περάσει μέσα από το φίλτρο hepa και στη συνέχεια να εισέλθει στην επιφάνεια εργασίας, έτσι ώστε η επιφάνεια εργασίας να διατηρείται πάντα υπό τον έλεγχο του ρέοντος αποστειρωμένου αέρα.Επιπλέον, υπάρχει μια κουρτίνα αέρα υψηλής ταχύτητας στο πλάι κοντά στο εξωτερικό για να αποτρέψει την είσοδο εξωτερικού βακτηριακού αέρα.
Σε μέρη με δύσκολες συνθήκες μπορούν να χρησιμοποιηθούν και ξύλινα αποστειρωμένα κουτιά αντί για καθαρό πάγκο.Το αποστειρωμένο κουτί έχει απλή δομή και μετακινείται εύκολα.Υπάρχουν δύο τρύπες στο μπροστινό μέρος του κουτιού, οι οποίες φράσσονται από τις πόρτες push-pull όταν δεν λειτουργούν.Μπορείτε να απλώσετε τα χέρια σας κατά τη διάρκεια της λειτουργίας.Το επάνω μέρος της πρόσοψης είναι εξοπλισμένο με γυαλί για διευκόλυνση της εσωτερικής λειτουργίας.Υπάρχει μια λάμπα υπεριώδους μέσα στο κουτί και τα σκεύη και τα βακτήρια μπορούν να μπουν μέσα από μια μικρή πόρτα στο πλάι.
Οι τεχνικές ασηπτικής λειτουργίας επί του παρόντος όχι μόνο διαδραματίζουν κεντρικό ρόλο στη μικροβιολογική έρευνα και εφαρμογές, αλλά χρησιμοποιούνται επίσης ευρέως σε πολλές βιοτεχνολογίες.Για παράδειγμα, διαγονιδιακή τεχνολογία, τεχνολογία μονοκλωνικών αντισωμάτων κ.λπ.
Ώρα δημοσίευσης: Μαρ-06-2024